胎牛血清知多少?

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胎牛血清采用健康母牛怀孕的八月龄胎牛血液为原料,经无菌采集、分离、微孔过滤后而成。本产品无支原体、无牛病毒、无噬毒体、内毒素含量低于1EU/ml,适用于细胞、组织器官培养、细胞株保藏、单抗研制,是医院、科研院校、动物疫苗、生物制药厂家重要培养基之一。 

wolcavi公司提供三种规格:500ml/200ml/100ml 
保存/运输:-5°C~-20°C
胎牛血清
牛血清的质量要求
随着科学技术的发展和生活水平的不断提高对生物医药产品的质量要求也越来越高,所以对制备工艺中所涉及到
的各种原材料的质量标准要求也越来越高,特别是对用于细胞培养基中的主要天然成份――牛血清的质量要求也
不断提高。牛血清包括胎牛血清、新生牛血清和成牛血清。
胎牛血清
(一)、WHO公布的《用动物细胞体外培养生产生物制品规程》中的要求:
1. 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。
2.有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。
3.证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。
4.血清要通过滤膜过滤除菌,保证无菌。
5.无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染,有些国家要求无细菌噬菌体污染。
6.对细胞有良好的支持繁殖作用。
(二)、我国在对牛血清的质量2000年版《中国生物制品主要原辅料质控标准》中提出比较严格的标准要求。包
括蛋白质含量,细菌、真菌、支原体、牛病毒、大肠杆菌噬菌体、细菌内毒素,支持细胞增殖检查。
(三)、美国对牛血清的质量要求:Gibco 和Sigma二家主要的美国牛血清供应商的牛血清都已进入到我国市场,
他们对其质量标准要求都极为严格,从血清来源到产品质量都有明确规定。
1) 血清来源:可从世界各国收集胎牛血清,但是必须符合他的质量标准和美国农业部进口要求。地方当局还不
清楚本地是否有牛海绵状病毒流行的血清不收集,有说明血清质量的证明资料:包括收集过程的全部资料、检验
结果和交付情况。
2)血清的收集:胎牛血清是心脏穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10个月内)血清静脉取血。血清采集条
件必须符合工业生产的标准:低温下采集、一次分离、分离后立即混合冻存。符合要求的血清56℃水浴30分钟灭
活。
3)血清的制备:
a. 超低IgG胎牛血清:通过亲和层析工艺去除胎牛血清中的γ球蛋白,使FBS γ球蛋白含量减到最低,一般IgG≤5ug/ml,生物学活性不变。
b. 血清透析:用12000~14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧
化酶/过氧化酶方法测定)。
c. γ-射线照射:已经证明γ-射线照射可以有效灭活血清中可能污染的病毒、支原体。照射剂量为30~45KG。
而且这个剂量的γ-射线照射不会改变血清的理化性质和对细胞培养的影响。
4)除菌过滤:经过上述处理的粗制血清再经过一系列除菌滤膜过滤包括0.2微米(micron)和0.1微米滤膜。FBS要
通过三层0.1微米滤膜,其他血清可通过0.2微米滤膜。
4.终产品血清质量
1)化学检定:渗透压pH
蛋白含量――电泳法
白蛋白 球蛋白 血红蛋白
随着牛年龄增加血清中总蛋白含量相应增加,总的血清蛋白含量可以确定产品规格和年龄。
2) 微生物学检查:细菌、真菌符合USP标准。
支原体:在支原体专业培养基上培养了3~4周,培养温度36℃±2℃
分别在需氧和厌氧条件下进行,有的还需要在支原体琼脂培养皿上传4次,Hoechst荧光素DNA染色检查那些培养法
无法检出的支原体如猪鼻支原体等。
3)内毒素检测
用鲎试剂检查。
4)细菌噬菌体检查
主要检查E.Coli(C300 or K-12)噬菌体。
5)激素含量测定
每批FBS对某些激素含量都要进行测定,包括:雌二醇、胰岛素、孕硐、睾丸素、甲状腺素等。
6)血红蛋白检测
血红蛋白与氧合血红蛋白的比≥70%,血红蛋白含量≤mg15/dl。
7)细胞生长效果测定
a.细胞克隆效果测定
细胞选择:Sp20/Ag-14 或P3X63-Ag8.653
 胎牛血清
保存血清最好的方法是什么? 上海信帆生物建议血清应保存在-5℃至-2O℃。但是,若存放于 4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。反复冻融会对血清的品质造成不良影响。

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Wolcavi Biotech致力于干细胞免疫治疗、分子生物学 、免疫学、体外诊断等相关领域的实验需求产品开发和销售。主要产品有抗原抗体|无血清培养基|细胞培养耗材并代理销售Abcam、Invitrogen(Gibco)、Roche、Sigma、R&D、Meridian等二十多家国外知名品牌。

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